流行病学研究的基本方法篇1

国际上于1982年建立了国际临床流行病学网(InternationalCliniealEpidemiolo-gyNetwork，INcLEN)，在美国、加拿大和澳大利亚建立了五个一级国际临床流行病学资源和培训中心，为世界部分国家的著名医科大学培训了大量的临床流行病学高级专业人材，并在18个国家的27所有名的医科大学建立了临床流行病学组(elinicalEpidemiologyunit，eEu)，担负着本地区或本国的人材培匆.1和研究工作，由于工作出色，成绩卓著，有的cEu已经或正式升格为地区性的二级临床流行病学资源和培训中心。其中，包括我国的华西医科大学及上海医科大学的两个cEU在内。该网每年召开一次国际学术年会，进行了广泛的学术交流，对促进医学事业的发展和学术水平的提高，起到了很好的作用。INCLEN的宗旨是:“在最可靠的临床依据和最有效地使用卫生资源的基础上，促进临床医学实践，从而致力于改善人民健康。为达此目的，本网内的各国临床医生、统计师及社会学家要共同奋斗，以建立和维持最佳的医学研究和医学教育的能力和水平，这些是致力于改善人民健康的最重要条件”。

在我国卫生部的领导和支持下，通过世界银行的卫生教育货款项目，1983年在我国华西医科大学、上海医科大学、广州中医学院建立了三个“设计、街量、评价(DME)”的国家培训中心，十多年来，为国家培养了大量的专业人材，现在二十余所卫生部部属及部队、地方重点医学院校相继建立了临床流行病学教研室或教研组，对临床本科和研究生开设了临床流行病学课程，取得了良好的教学效果，培养了高质量的医学人材;他们编著了本学科的学术专著和列素教材，打下了本学科的学术基拙;加强了临床科学研究，组织了多次全国临床流行病学学术会议，进行了广泛的国际和国内的学术交流，提高了本学科的学术水平，同时取得了丰富的优秀教学和科研成果。对我国临床医学的发展起到了良好的推动作用;在1989年建立了中国临床流行病学网(CHINACLEN)。在1993年建立了中华医学会临床流行病学学会，对本学科的发展打下了良好的组织基础。

二、本学科的特色和任务

(一)临床流行病学的学科基础是临床医学。其任务是采用现代临床医学研究的科学方法，以研究危害人体健康的重要疾病的病因、危害因素、诊断、防治及预后等规律。目的在于提高临床医学的诊治和疾病预防水平，促进临床医学的进步。

(二)临床流行病学工作者必须是临床医生。临床流行病学必须为临床研究和诊治创新临床研究方法学、善于排除各种偏倚因素的干找，确保临床研究的结果建立在可靠的医学证据基础上(evidence一basedmedicine)。从而使研究的结论维持高度的真实性(validity)，促进临床经验医学向科学学飞跃。为此，临床流行病学工作者首先必须是不脱离临床实践的具有良好临床基础的临床医生。

(三)本学科的研究对象是病人及其患病的群体。将临床医学从医院内的个体病人诊治，扩大到社会人群的疾病诊断与防治，此系本学科“流行病学”的特征。这样就突破了传统的临床医学局限医院内的框框，使医院内与人群中对疾病的诊治研究相结合，无疑对疾病的早期发现与有效地防治以及对整个疾病发生、发展和转归规律的认识会有重要意义和价值。

正如著名的国际临床流行病学创始人之一大卫·萨克特博士(Sackett，DL)指出的:“在临床医学实践中善于破旧立新，应用临床研究中创立的新方法和新知识，指导临床医疗和教学实践，解决临床疾病的诊治问题，发展临床流行病学，促进临床医学现代化，否则，这门学科就会成为教条而凋姜”。

三、本学科研究的方法学

由于患者不同的临床特点、病程、心理状态和社会经济地位手，构成了不同的疾病或同一疾病不同患者的l临床状况的复杂性。而临床资料的来源是患者的病史、体征、实验及某些特殊检查的结果，这些资料是否真实可靠，直接关系到临床研究和诊治的质童。而传统的临床科研或经验总结，往往利用的是现存资抖，由于受资料质量的限制，本身就制约了临床医学的研究水平，这就是问题的症结所在，不解决这类问题，就很难使临床科研产生质的飞跃。对此，逐渐发展了临床流行病学的方法学一临床医学研究的设计、汉lJ量与评价(Design、MeasurementandEvaluation“ne一sniea一Researeh，oME)。它有着+分丰富的内涵。

(一)设计(Design):注重下列要素:

1.根据不同性质的临床研究课题，在注重科学性和可行性的前提下，抉择相应的设计方案。

2.研究对象的正确诊断:研究的对象，一定要符合临床公认的诊断标准，同时按课题设计的具体要求，确定具体的纳入标准及排除标准，确保研究对象的可靠性。

3.样本含量的怡葬要合适。

4.试验措施要有创新性。

5.试验的期间要合适。不宜过短或过长。

6.要有识别和防止偏倚因素干扰的对策。

7.要正确地应用统计学分析的方法。

(二)测蚤(Measurememt):病因致病或药物的治疗效应，需要未用一些方法及指标来发现和测蚤，作为诊断和治疗效果的依据。

1.试验的措施一定要有反应性和可测蚤性，否则，就没有测黄的价值。

2.测量的方法要有良好的敏感性和特异性，否则，或发生漏诊或误诊。

3.测童指标的判断标准和临床意义要明确，否则，就难以评价客观效果。

(三)评价(Evaluation):

1.临床意义的评价:建立在临床科学证据基础之上而总结的关于病因学、诊断、治疗与预后等严格评价的标准和方法，有利于分析和评价临床研究结果的真实性和临床意义。

2.研究结果的统计学分析和评价:如果研究的结果具有临床意义，则必须应用正确的统计学方法对结果进行显著性检验，以评价临床差异的真实程度。

3.研究结果的卫生经济学的评价:包括成本一效果，成果一效益及成本一效用分析和评价，肯定那些质佳价廉的临床研究成果能推广应用。

四、本学科对临床医学的作用和价值

(一)为临床医生提供对疾病病因、诊断、治疗及预后等一系列评价的原则与方法。有利于鉴别真伪与应用可靠的研究成果。

流行病学研究的基本方法篇2

欧洲爆发流感疫症，导致2,000万人死亡(第一次世界大战的死亡人数只是850万人)，是历史上最严重的流感疫症。

1957-1958年

1957年2月在中国贵州爆发(病毒可能是在1956年从苏联传来)，其後散播至世界各地。全球受影响的人数占总人口的10%至30%，但死亡率较1919年的疫症为低，约为总人口的0.25%。

1968-69年

流感从香港开始，全球的死亡人数达70万人，其中美国就占3万多人。

1976年

新泽西一名青年染上猪流感，引致恐慌会爆发新疫症，於是大规模推行疫苗注射。

1986-1993

世界不同地区发生数宗人类染上猪流感的病案。

1997年

香港发生禽流感，原本只影响鸡只的病毒亦令人类患病。香港政府下令层宰150万鸡只。受影响的人数为18人，其中6人死亡。

中国是全球流感高发国家之一，发病情况十分严重。由于流感流行，影响生产、学校停课、医院病人骤增等问题和现象亦屡见不鲜，而且历史上几次流感大流行源于中国，因此，中国的流感监测工作对全球起着举足轻重的作用。

卫生部高度重视流感的监测和防治工作，将流感列为重点防治的传染病之一，加强对流感防治工作的领导，定期研究与部署流感防治工作，组织制定流感防治策略，进一步加大防治力度，目前已在全国31个省开展流感监测工作 。

随着中国经济的发展，人口流动频繁，人口老龄化，流感高危人群比例不断增加，流感的危害及其监测和防治工作的重要性也进一步引起了各级政府的高度重视 。

近年来，在中国，随着人民生活水平的提高，医药卫生条件的改善和医疗保健知识的普及，人民群众对流感的防治，尤其是流感疫苗的使用高度关注，流感疫苗的使用量比以前明显增加。但是，流感疫苗使用不同于其它疫苗，在疫苗种类、接种对象、接种时间等方面都应进行科学的选择。因此，卫生部组织制定了全国性的流感疫苗免疫策略，以指导各地科学、规范、有序地开展流感疫苗接种工作，更大程度地发挥流感疫苗的免疫预防作用，让公众了解关于流感疫苗使用的科学知识 。

目前，我国已建立了全国性流感监测网络，并具备较好的工作基础。我们将继续加强和完善监测网络的工作，使之成为系统、规范、灵敏、有效的监测网络，收集各类监测信息和资料，综合分析，为流感的预防和控制决策提供科学的依据。同时，要逐步开展和加强流感对人群健康的危害和对社会经济的影响及流感疫苗效益等方面的研究。

根据流感监测和其它方面研究的结果，不断对我国流感免疫策略进行修改和完善，以保护人民群众健康，促进社会经济发展。

流感病毒的快速诊断与流感疫情监测的研究

成果简介：该课题研究建立了一套由3种快速诊断方法组成的可用于不同场合进行检测的快速诊断方法，尤其是摇床吸附微量细胞板短期培养法是国内首次报导的一种快速诊断方法。建立了复盖宁波市全市范围的流感监测网络，共检测流感毒株330株，仅2004年就向国家流感中心上送流感毒株250株，其中50株被国家流感中心选送到世界卫生组织作为筛选流感疫苗的备用株。建立了宁波市2002年以来甲3型流感病毒HA1基因变异情况的基因进化树。为宁波市今后的流感病毒防治提供了分子生物学的基础。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：宁波市疾病预防控制中心

治流感病毒液及其制备方法

成果简介：课题选用名贵中药，采用高科技手段，发明专利产品“治流感病毒液”（对外宣传和检验单为“东方神液”）。特点：见效快；降温快；无副作用；能对付任何流感变异性病毒；预防感冒效果好；可能对“非典”有作用。该产品市场前景非常广阔，据统计全世界63亿人口，平均每人每年患感冒4次。该产品技术成熟，属世界领先水平，先后经湖南、湖北、黑龙江、安徽、福建等省上万人次应用效果确实好，但目前主要问题是：资金缺乏，无法投产。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：武汉巨英超王高科技有限公司

流感病毒快速检测方法的建立及应用

成果简介：建立了一种敏感、快速的流感病原的诊断方法。首先将病人咽拭子标本接种狗肾传代细胞（MDCK Cell）培养24～48小时，可以使流感病毒在采集标本后立即在细胞内增殖，克服了流感病毒容易在常温下失去繁殖能力，其RNA易降解的缺点。上述短时培养结束后，用流感特异性引物做反转录多聚酶链反应（RT-PCR），进一步检测流感病毒基因，为临床提供快速、特异检测流感病毒基因，确定流感病毒感染与流行的方法。应用上述方法，在流感流行期，快速确定流感病原采取消毒、隔离等措施，防止流感流行，对适合使用疫苗者提供了帮助，取得了巨大的社会效益。

所处阶段：中期阶段

完成单位：中国医科大学

我国马流感病毒不同分离株生物学

成果简介：本项目分离到了青海马流感病毒株并采用病毒分离鉴定、血清学、病理学、动物感染试验、反转录－聚合酶链式反应、核酸序列比较分析等综合性手段，对该病毒株进行了深入的研究，证明该毒株为H_3N_8。经过基因组进行比较研究发现，该毒株与我国香港1992年分离毒株关系密切，血凝素基因核苷酸同源率达94%以上，神经氨酸酶基因同源率达96%以上，白基因核苷酸与欧美等国家的参考毒株同源率达96%以上，其他基因核苷酸的同源性也达90%以上，与1974年北京马流感病毒株和1989年吉林马流感病毒株明显不同。研究表明我国青海省马流感病毒分离株可能从欧洲经由香港传入大陆。同时，又将其与其他两个病毒株进行了比较。建立了该病的诊断方法，进行了疫苗制备的初步试验以及明确了我国马流感病毒在进化系统中的分子生物学地位，为我国防制马流感提供了有效的技术平台。本研究明确了我国马流感病毒间遗传演化关系，建立了马流感HI和琼扩诊断方法，并初步制备了马流感灭活疫苗。

所处阶段：中期阶段

完成单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

成人接种卡介苗（BCG）对流感预防作用的研究

成果简介： 该课题研究通过接种BCG，提高人机体的非特异性免疫力，杀灭或遏制病原体，使流感病毒虽然感染人但不致病。本次研究结果，BCG接种对流感保护率达74.49%。该研究不仅国内，而且国外都未见到这类的研究报道。它是BCG用途的创新，扩大了BCG的使用范围；开创了预防流感的新途径，探索出预防流感的新方法，增加了人类征服流感的一种手段。BCG接种简单易行，保护率高，费用低，时效长，实用性好。BCG一直广泛使用在全球；是生物制品中最安全疫苗。使用范围为全世界；使用对象几乎为全人类。研究中尚未探讨清楚BCG接种后防流感的机理。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：淮安市疾病预防控制中心

穿琥宁抑制流感病毒诱导狗肾传代细胞凋亡的研究

成果简介： 该研究国内外首次报告穿琥宁有抗HN和乙型流感病毒诱导MDCK细胞凋亡的作用，其作用与病毒唑相似，并从细胞基因调控着手研究病毒的致病机理及穿琥宁的抗病毒作用为临床防治流感提供了新的实验依据，增加了可信度；穿琥宁抑制HN和B型流感病毒诱导MDCK细胞AP的抑制率（IR）与利巴韦林类似，进一步证明穿琥宁是抗流感的良药，对该药在治疗流感领域产生了积极的影响；南昌地区流感由甲型和乙型流感病毒引起，2000年3月发生的流行由甲型流感病毒所致，为制备疫苗和研究流感病毒提供了新的变异毒株；采用鸡胚和狗肾传代细胞（MDCK）分离流感病毒可提高病毒分离的阳性率。

所处阶段：中期阶段

完成单位：江西医学院第四附属医院

H5N3亚型流感病毒细胞培养灭活疫苗的研究

成果简介：H5N3细胞苗的研制填补了禽流感防制的一项空白，该研究居国际先进水平。查新结果表明，利用反向遗传学技术构建全部基因都来自禽流感病毒的重组禽流感细胞疫苗株为国际上首次报道。rH5N3油乳剂灭活细胞苗免疫持续期和对强毒攻击保护性完全达到了鸡胚苗的效果。由于H5N3疫苗株全部基因都来源于禽流感病毒，生物安全程度高于由人－禽流感病毒拯救的重组病毒；保护性抗原基因来自国内最新流行株，因此疫苗株与流行株的抗原匹配性好，免疫效果确实。此外，采用常规的血清学方法就可以进行免疫与野毒感染家禽的鉴别诊断。

所处阶段：初期阶段

完成单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

我国马流感病毒不同分离株生物学特征的研究

成果简介：本项目分离到了青海马流感病毒株并采用病毒分离鉴定、血清学、病理学、动物感染试验、反转录－聚合酶链式反应、核酸序列比较分析等综合性手段，对该病毒株进行了深入的研究，证明该毒株为H_3N_8。经过基因组进行比较研究发现，该毒株与我国香港1992年分离毒株关系密切，血凝素基因核苷酸同源率达94%以上，神经氨酸酶基因同源率达96%以上，白基因核苷酸与欧美等国家的参考毒株同源率达96%以上，其他基因核苷酸的同源性也达90%以上，与1974年北京马流感病毒株和1989年吉林马流感病毒株明显不同。研究表明我国青海省马流感病毒分离株可能从欧洲经由香港传入大陆。同时，又将其与其他两个病毒株进行了比较。建立了该病的诊断方法，进行了疫苗制备的初步试验以及明确了我国马流感病毒在进化系统中的分子生物学地位，为我国防制马流感提供了有效的技术平台。

所处阶段：中期阶段

完成单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

流感嗜血杆菌培养、鉴定及药物敏感性研究

成果简介：该研究对张家口贫困地区健康人群及呼吸道感染儿童HI携带及感染情况进行了调查研究，并对分离菌株进行生物分型及药物敏感性研究，结果表明：不同年龄健康人群HI带菌率不同；黄连、连翘、金莲花等10种中草药对HI菌株均有不同程度的抑菌作用，且黄连的抑菌作用最强。该研究达国内领先水平。

所处阶段：初期阶段

完成单位： 张家口医学院

天津地区流感病毒分子流行病学和致病性的初步研究

成果简介：本项目首次对天津地区分离的流感病毒进行基因序列分析，从分子水平上了解天津流感病毒的变异特点和规律。首次应用SSCP方法用于流感病毒HA1基因片段点突变的研究，并作为初步筛查流感病毒代表株的方法。比较了甲3亚型“O”相及“D”相毒株、乙型中Victoria与Yamagata系之间致细胞凋亡能力。该研究建立了一套检测病毒的分子生物学实验方法，为我市预防控制流感提供了病毒分子生物学依据，提高了应对卫生突发事件的能力。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：天津市卫生防病中心

禽H9N2流感病毒感染人的发现及其基因来源的研究

成果简介：禽H9N2毒株能感染人，并能在自然界中发生基因重配，同时重配子能感染人均为国际上首次发现，此发现表明禽流感病毒能直接感染人，也可能原先对人不致病的禽流感病毒，通过基因重配形成了对人致病的重配子。因此上述发现味彻底揭开流感大流行株起源及我国流感多发的原因提供了新的科学依据，证实了禽流感味一种新出现的传染病，为国际反生物恐怖及流感大流行防治策略制定提供了新内容。

所处阶段：中期阶段

完成单位：中国疾病预防控制中心病毒学研究所

抗流感药奥司他韦（二氨基莽草酸酯）合成新工艺

成果简介：该产品是其活性代谢产物的药物前体，其活性代谢产物是强效的选择性的流感病毒神经氨酸酶抑制剂。病毒神经氨酸酶活性对新形成的病毒颗粒从被感染细胞的释放和感染性病毒在人体内进一步传播是关键的。药物的活性代谢产物抑制甲型和乙型流感病毒的神经氨酸酶。体外在很低的毫微克分子浓度即有抑制效应。在体外观察到活性代谢产物抑制流感病毒生长，在体内也观察到其抑制流感病毒的复制和致病性。该产品通过抑制病毒从被感染的细胞中释放，从而减少甲型或乙型流感病毒的传播。以具有莽草酸骨架结构的1-环己烯-4-酮甲酸乙酯为起始原料，经10步反应合成奥司他韦的工艺过程具有新颖性。

所处阶段：初期阶段

完成单位：南京莱因医药科技有限公司

双重实时荧光定量RT-PCR快速检测A、B型流感病毒的研究

成果简介：该研究利用双重实时荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测A、B型流感病毒的方法。根据A型流感M基因和B型流感HA基因的相对保守序列分别设计一对引物及其相应的Taqman探针，建立、优化单一和双重反应体系后，利用十倍稀释法对已知滴度的流感病毒进行梯度稀释，检验方法的灵敏度并建立相对定量标准曲线。结果表明，A型、B型流感病毒双重反应的灵敏度分别为2.56 × 10^(-5)和5.0 × 10^(-5) TCID50，说明双重反应中A、B型的引物、探针、模板之间无相互干扰，具有很好的稳定性和重现性。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：深圳市疾病预防控制中心

鸭、鹅、猪H5、H7亚型和A型流感病毒通用型抗体检测力法的研究

成果简介：以杆状病毒为表达载体，表达了禽流感病毒的白基因，与流感病毒白具有相同的生物活性。重组病毒表达产物与流感病毒抗血清作免疫琼脂双向扩散试验，均出现明显清晰的沉淀线，与全病毒琼扩抗原出的沉淀线完全吻合。用重组杆状病毒的表达产物制备了A型流感病毒及鸭、蛾、猪H5、H7亚型病毒通用型重组白抗原，H5、H7亚型流感病毒的HI分型抗原和血清。建立了以NP为检测抗原鸭、鹅型禽流感间接ELISA检测方法，以全病毒作为抗原建立了猪流感抗体间接ELISA诊断方法，确立了最佳反应条件和术式。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

克感利咽口服液的新药研究及其抗流感病毒的免疫―自由基机理

成果简介：本课题研制了克感利咽口服液（克感液），并从整体水平、器官水平、细胞水平和亚分子水平进行了多层次、多指标的综合研究。肯定了克感液的抗流感病毒作用，并首次提出抗病毒的免疫-自由基机理和中药在抗病毒作用中的重要地位。证明了中药复方克感液可通过调节机体氧化应激水平起到非常重要的治疗流感作用。此外还通过黄嘌呤氧化酶体系发光法和全血吞噬化学发光法，证明了克感利咽口服液具有较强的清除活性氧作用。为克感利咽口服液能降低氧化应激水平并参与抗病毒的免疫－自由基机制提供了可靠的实验依据。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：中国中医科学院广安门医院/中国中医科学院第二临床医药研究所

我国儿科流感嗜血杆菌性疾病及分离株耐药分子流行病学研究

成果简介： 该研究从建立流感嗜血杆菌b型（Hib）标准化诊断技术和感染菌株分子生物学研究平台入手，引入国外先进培养分离技术、建立多种特异性抗原、抗体检测方法、基因诊断和分型方法，为其感染和耐药的流行病学研究提供有效工具。该项目进行了以人群（合肥市）为基础、前瞻性、小儿化脓性脑膜炎三年流行病学监测，并进行了两次以医院(北京儿童医院)为基础小儿化脓性脑膜炎病原学调查。连续五年对北京、上海、广州三所儿童医院随机选取5059例上呼吸道感染儿童进行Hi鼻咽携带和菌株常用抗生素敏感性监测，并采用分子生物学方法对氨苄青霉素耐药菌株进行耐药机制和基因分型研究。

所处阶段：中期阶段

完成单位：首都医科大学附属北京儿童医院

广州地区呼吸道感染儿童流感嗜血杆菌、肺炎链球菌携菌和耐药监测及分离鉴定方法的研究

成果简介：该研究首次在广州地区进行了连续5年儿童呼吸道感染肺炎链球菌、流感嗜血杆菌耐药监测。首次对流感嗜血杆菌耐药性的季节分布、性别差异、健康儿和上呼吸道感染儿携流感嗜血杆菌和耐药性的比较、耐药表型的分布、多重耐药等方面进行全面、系统地研究,建立了一整套完整的对菌株的保存，复苏的技术。首次用克林霉素纸片法检测广州地区对红霉素耐药的肺炎链球菌中ermB及mefE基因分布，并比较ermB基因与mefE基因对红霉素耐药的肺炎链球菌的耐药性；筛选出广州地区治疗儿童流感嗜血杆菌感染的一线药物以二代头孢菌素和/或青霉素类/克拉维酸为首选，治疗儿童肺炎链球菌感染的一线药物以青霉素/克拉维酸类药物为首选。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：广州市儿童医院

猪型（H1N1）和马2（H3N8）亚型流感病毒发现的意义及其来源的研究

成果简介：该项目采用现场与实验室相结合，走协作道路，应用了综合性方法，即从一般的生物学至当今国际上先进的分子生物学技术。这样全面系统的研究方式在国内实属罕见，在国际上也属先进之列。不仅使实验结果更加可信和可靠，而且也保证了实验在较高的水平上进行。猪型（H1N1）流感病毒于1930年就已从美国猪群中分离到，而后陆续蔓延到欧洲和亚洲，我国从1976年开始寻找它在猪群中人群中存在的线索，但1991年之前均未能找到它，更未能找到被猪型病毒感染的患者。同样，马2（H3N8）亚型毒株于1963年已从美国迈阿密马群中被发现，而后波及到欧洲和亚洲。

所处阶段：中期阶段

完成单位：中国疾病预防控制中心病毒学研究所

猪流感（H1-H3亚型单价和H1-H3亚型双价）氢氧化铝胶灭活疫苗的研究及应用

成果简介：该项目对分离自中国不同地区、不同亚型SIV流行株的生物学特性进行了研究，筛选出免疫原性好，与全国范围流行的H1N1和H3N2亚型各抗原群均有很好抗原反应性，对鸡胚高滴度适应的流行株作为种毒，接种非免疫鸡胚大量增殖后收取无菌尿囊液，灭活使病毒失去感染和复制能力但保持其良好的免疫原性；含猪流感病毒尿囊液的蛋白质抗原与氢氧化铝胶混合、浓缩，制成的灭活疫苗，可较长期存留在猪体，持续释放抗原并刺激猪内持续产生特异性抗H1N1或（和）H3N2亚型猪流感，保护率高，免疫效果确实，免疫期持续时间长，可有效降低高热、咳嗽、呼吸困难等临床症状，增加平均日增重，显著改善饲料转化率。适用于中国不同地区猪场和猪群对H1N1和H3N2亚型流感的预防和紧急免疫。

所处阶段：成熟应用阶段

完成单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

鸡新城疫－流感－传染性囊病－肾（腺胃）型传支四联油乳油剂灭活苗的研究

流行病学研究的基本方法篇3

Einstein College of Medicine

Biostatistics and

Epidemiology

A Primer for Health and

Biomedical Professionals

Third Edition

2004, 243pp.

Softcover $ 33.20

ISBN 0-387-40292-6

本书是由美国Albert Einstein医学院流行病学和群体健康系流行病学室Sylvia Wassertheil Smoller教授编著的。第一版于1990年出版，第二版于1995年出版，现为第三版。本书的特点是根据流行病学和统计学的基本框架，使读者理解流行病学与生物统计学的基本原理，理解“为什么做”和“做什么？”学会“如何做、如何解释”。书中的内容都是临床试验和基础研究中最常用的、或是在文献中经常引用的。

全书共分9章。第1章讲述科研方法问题，包括逻辑推理、变异、研究设计、变量的量化、无效假设、假设检验、检验错误的类型、显著性水平等；第2章叙述概率的一些基本概念；第3章介绍常用的统计学检验方法；第4章介绍流行病学的基本概念，包括流行病学的应用、常用指标、流行病学研究类型、偏倚、混杂、交互、多变量分析等；第5章介绍筛检的基本概念；第6章是叙述随机对照临床试验；第7章介绍生活质量的评价，包括量表的结构、可靠性、真实性、敏感性（反应性）以及用量表评价生活质量的局限性；第8章介绍遗传流行病学的基本概念，包括双生子研究、连锁和联系分析、传递不平衡检验等；第9章阐述科研伦理学与统计学的关系。第8、9两章的内容在人类研究中十分重要，是第三版新增加的，是一般流行病学或统计学入门书籍中所没有的。

书后附有9项附录，介绍正文中各种统计学计算的实例，以使读者能够更顺利阅读本书、以及如何实际计算，包括卡方、Z值及t-值的临界值表、Fisher精确检验、几组比较的Kruskal-Wallis非参数检验、相关系数计算、率的年龄调整、比值比的可信性、两个变量的“J”或“U”型关系、量表记分改变的适宜性（敏感性）评价、以及遗传学基本原理和知识。书后还附有参考文献及建议阅读的书目，读者如需了解更深入的、超出本书范围的内容、或涉及高等数学方面的内容，可阅读这些推荐的教科书。书末附有主题索引，便于读者检索。

本书以科学的哲学和逻辑学原理，讨论统计学检验的基本原理，而不是让读者去做具体的统计学检验。全书各章节都是独立的，读者可不按顺序阅读，只阅读感兴趣的部分。本书特别适合那些没有或很少有数学背景的读者，使他们能够读得懂、用得上。

本书内容既简明，又适合范围较广的读者需要，所阐述原理和方法适合多种领域，包括医学、公共卫生、心理学、教育学。本书是一本简明的流行病学与生物统计学教科书，适合从事临床和基础研究的医生、医学专业本科生、研究生，或非医学专业学生参考，也可供程度较高的读者、以及对生物统计学与流行病学的逻辑学和方法学感兴趣的研究人员参阅。

乌正赉，教授

流行病学研究的基本方法篇4

[中图分类号] R725.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）33-0045-03

自1973年澳大利亚学者Bishop等首次发现轮状病毒（Rotavirus，RV）以来，人们对RV的研究越来越深入。5岁以下的婴幼儿大部分感染过RV肠炎[1]。在发展中国家，小儿腹泻常常是婴幼儿死亡的主要原因，仅次于肺炎，排在第二位[2]。大约90%的RV感染相关死亡病例发生在亚洲和非洲的发展中国家[3]。我国每年有4万婴幼儿因RV性腹泻而死亡[4]。RV型别多，易变异，人群普遍易感。因此，不同地域RV流行特征明显不同，同一地区不同季节型别也不同，甚至同一地方同一种型别也可能存在多种毒株同时流行[5]。因此有必要建立广泛的RV监测网，动态监测RV流行株的变化，从而为疫苗研发提供数据支持。郑州属温带气候，是我国RV流行的代表性地区之一。为了解郑州地区秋冬季RV基因型别，为RV疫苗的研制以及临床应用提供依据，本研究收集郑州市第一人民医院及郑州人民医院儿科2013年9月～2014年3月500份门诊及住院部腹泻患儿的粪便标本，进行G基因型分型，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集2013年9月～2014年3月郑州市第一人民医院及郑州人民医院儿科门诊及住院腹泻患儿标本500份，其中女193例，男307例，年龄在5岁以下，具体临床诊断标准见参考文献[6]。

1.2 RV检测及提取试剂

胶体金法检测RV，使用小量柱离心式/液体样品RNA/DNA抽提试剂盒（购自上海华舜工程有限公司）提取RVRNA。

1.3 RV的G分型

RT-PCR分别扩增RV的VP7全长基因，net-PCR进行血清型分型。所用引物均有上海英骏生物基因工程股份有限公司合成，具体分型方法及引物见参考文献[7]。

1.4 统计学处理

采用SPSS17.0进行统计学分析，计数资料采用χ2检验及直接计数法，P

2 结果

2.1 轮状病毒感染的年龄和性别分布

通过ELISA方法检测结果显示：202份阳性标本中，男女性别无明显流行病学特征。轮状病毒感染患儿以6个月～1岁居多， 与其他年龄段比较，差异具有统计学意义（P

2.2 RVG血清型分型结果

对202阳性标本进行G基因分型研究，RVG血清型以G1型为主，并有不同的混合性感染病例。见表3。

3 讨论

目前国内外对于轮状病毒腹泻的研究较多。研究路线比较成熟。本研究对2013年9月～2014年3月郑州地区腹泻患儿进行监测RV阳性率为40.4%，与2005年10月～2006年10月阳性率相比51.97%[8]及2010年RV感染率50%相比有所下降[4]，低于国内其他地区如乌鲁木齐2007年RV感染率48.14%[9]、重庆地区2008年的50.69%[10]，与国内其他地区相比基本一致。

A组RV作为引起婴幼儿腹泻的主要病原体，主要感染人群为6个月～2岁的婴幼儿，随年龄增长感染比例下降，考虑可能为年龄增长儿童抵抗力增强有关。RV检出率在男性患儿和女性患儿之间国内报道各有区别。本研究显示RV阳性率在男女患儿之间无差异。

VP7为一种RV糖蛋白，是型特异性抗原，目前已有27个G血清型和35个P基因型被确定[11]。RV全球范围内最流行的组合为G1P8、G2P4、G3P8、G4P8、G9P8[12]。按照NCBI的分类标准VP7血清型有12个血清型（G1、G2、G3、G4、G5、G6、G8、G9、G10、G11、G12）和未能分型，其中5个（G1、G2、G3、G4、G9）型最为常见，且G9有增多趋势[13]，并发现不常见的G9、G10等型别的出现。高志勇等[14]监测北京地区2011年RV分子流行型别以G1+G9P8混合型为主。近年来河南省部分地区2005年、2006年、2010年郑州地区监测的流行株以G3为主相比流行株有所改变[4]。本研究发现2013年9月～2014年3月郑州地区RV基因分型以G1型为主，也有G9型的出现。目前国内也常有报道发现G9型轮状病毒。并逐渐成为继G1～G4之后第5种最为流行的血清型，本研究发现有混合感染株以及不常见的G9型，G9型较2010年比例有所增加，这是否与气候、环境变化以及样本量增多等因素有关，需要进一步研究。

RV腹泻的严重程度和RV血清型的相关性研究一直是个热点。2013年WHO在关于RV疫苗的意见书中提出RV的型别通常与疾病的严重程度无关。本课题研究发现在所有研究的RV分型中合并呼吸道感染的病例G9型居多，这是否与RVG9型易合并呼吸道感染有关还是与G9型毒力强有关，需要进一步的研究证实。

目前国际市场上销售的RV疫苗为默克公司研制生产并于2006年上市的RV5疫苗（5价牛-人重组疫苗），商品名RotaTeq，主要预防G1～G4血清型RV引起的胃肠炎以及葛兰素史克公司研制生产并于2008年上市的RV1疫苗（单价人RV疫苗），商品名Rotarix，主要预防由G1、G3、G4、G9导致的RV胃肠炎。在我国使用的是兰州生物制品研究所有限责任公司生产的羊RV疫苗，该疫苗于1998年取得国家认可并获准进行试生产，2001年获得国家食品药品监督管理局颁发的正式生产批件，投入使用安全有效。本研究还发现口服RV疫苗仍再次感染的情况，这说明RV疫苗的使用并不能完全起到预防作用。具体原因有可能是与RV具有分节段的基因组，极易发生基因重配和基因重组甚至点突变有关[15]。目前越来越多的RV的型别流行的研制给疫苗带来挑战，理想的RV疫苗应当有很广谱抗RV作用，且免疫性强无毒副作用。因此对RV流行病学的检测意义重大。

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流行病学研究的基本方法篇5

中图分类号：R-03

文献标识码：A

文章编号：1673-7717(2008)03-0639-02

健康是一个多维的立体结构，包括生理、心理、社会功能、角色功能及个人的总体感受，每个方面既相互独立，又彼此相连、互为因果。而游离于健康与疾病之间存在的“第三状态”，即亚健康状态也就应运而生了。但由于亚健康状态尚无器质性损害，而又严重影响着人们的生活质量和工作效率，临床表现多为自觉症状，并呈多样性和不典型性，现代医学缺乏特异性的诊断手段和客观的疗效评价指标，从而给临床诊治和研究带来了困难。

中医学对亚健康早有认识，《内经・四气调神大论》中有云：“圣人不治已病治未病，不治已乱治未乱”，所谓“未病”、“未乱”就是指疾病前状态，或某种疾病的征兆，是质变为疾病的量变积累过程，也就是所说的亚健康状态。现代医学所关注的是人体器质性、病理性改变，而中医学的优势在于它的认识论、方法论更加注重研究人体的功能反应状态，其临床干预往往也是对人体“功能态”的诊断和治疗。

针对我国目前亚健康尚无系统监测工作的现状和基于中医证候学基础上亚健康流行特点与趋势，有计划、连续、系统地开展亚健康监测与控制方法的研究，是加强我国亚健康预防控制的重要技术保障，是有效开展预防和治疗亚健康状态工作的重要内容。针对亚健康概念的内涵，充分发挥中医健康观的优势，通过对亚健康范畴研究，阐明亚健康的内涵。在此基础上，研究亚健康评价标准、评价方法及量表。在前期亚健康状态与中医“望、闻、问、切”四诊指标、人体生理功能指标相关性以及中医证候类型与体质学研究的基础上，研究亚健康人群的基本特征及中医辨识与分类标准、指标和方法，为进一步对亚健康人群进行个体化预防和干预提供指导。

1 研究要点

基于社区亚健康流行病学的调查分析和质量控制的研究在我国起步尚晚，特别是社区亚健康监测方法及监测标准的制定研究，包括亚健康监测标准的信度及科学性研究、亚健康监测方法的可执行性研究等领域存在空白。从这一研究来说，笔者认为应该从以下几个方面予以加强。

(1)制定亚健康状态中医证候学诊断标准，以四诊和其他诊断方法为基础，选定若干组相应证候群，对有持续3个月以上反复出现的不适状态或适应能力显著减退，而无明确疾病诊断或有明确诊断但所患疾病与目前不适没有直接因果关系的状态的相应人群进行诊断监测，同时研制《社区亚健康状态流行病学调查问卷》，对亚健康人群社会生活情况、饮食习惯、心理等相关因素进行亚健康相关性研究，通过流行病学调查，总结大样本亚健康流行病学研究的组织实施办法，质量控制及数据处理等具体经验，为亚健康监测和中医“治未病”临床研究提供技术平台。形成行之有效的诊断监测标准，推动亚健康的深入研究。

(2)基于中医证候学基础上亚健康流行特点与趋势，有计划、连续、系统地开展亚健康监测与控制方法的研究，是加强我国亚健康预防控制的重要技术保障，是有效开展预防和治疗亚健康状态工作的重要内容。针对亚健康概念的内涵，充分发挥中医健康观的优势，通过对亚健康范畴研究，阐明亚健康的内涵。在此基础上，研究亚健康评价标准、评价方法及量表。在前期亚健康状态与中医“望、闻、问、切”四诊指标、人体生理功能指标相关性以及中医证候类型与体质学研究的基础上，研究亚健康人群的基本特征及中医辨识与分类标准、指标和方法，为进一步对亚健康人群进行个体化预防和干预提供指导。对亚健康的影响因素、症状和中医证候特点、分布规律进行研究，同时通过科学的监测方法，了解区域亚健康流行现状、特点及其影响因素，掌握亚健康流行规律和趋势，确定行之有效的监测标准和方法，形成《社区亚健康人群监测标准和监测方法规范》。

(3)基于社区亚健康流行病学的调查分析和质量控制的研究在我国起步尚晚，特别是社区亚健康监测方法及监测标准的制定研究，包括亚健康监测标准的信度及科学性研究、亚健康监测方法的可执行性研究等领域存在空白。建立亚健康监测网络，系统对于亚健康人群实施监测和预防，基于实践基础上的预防干预手段及效果评价研究对于科研及公共卫生事业的发展极具意义和价值。建立亚健康监测网络构架，在已有的预防监测网络的基础上设立1～2个省级亚健康监测示范城市。依托各省市健康教育所，疾病预防与控制中心和其它相关单位培养相应的健康教育工作者，亚健康监测及健康管理人员，开展规范化亚健康监测和评价工作。

2 构建思路

按照工作进度的要求，亚健康监测网络的构建工作应分为3个阶段实施，即流行病学调查基础上的监测方案设计阶段；结合中医临床、医学心理学、医学营养学、运动医学及其他学科基础上的全面监测实施阶段；基于资料统计分析基础上的监测标准和方法评价分析和总结阶段。

2.1 流行病学调查基础上的亚健康监测方案设计阶段

以中医临床证候学及医学心理学为基础，确定亚健康的诊断监测标准；制定、编制科学合理的能够反映中医特点的《健康人亚健康状态中医证候临床流行病学调查问卷》，在调查问卷基础上，研究亚健康所构成中医证候的特征，选择若干项特定症状和指标，建立、修订和完善亚健康中医证候诊断和监测标准，研究调查问卷和监测模型的信度、效度及灵敏度的评测，同时依托预防监测网络，建立亚健康人群诊断标准、调查程序及筛选方法，制定亚健康状态人群监测采集、管理、质控方法及相关职责；并制定相关人员培训及管理方案。

2.2 结合中医临床 医学心理学及其他学科基础上的全面监测实施阶段 大样本证候调查队伍的组织、培训和考核；实施大样本调查；建立亚健康人群证候学中医诊断及监测系统；监测方法和修定与完善监测内容

2.3基于资料统计分析基础上的监测标准和方法统计分析和评价总结阶段 针对我国健康前移战略的目标需求，结合中医“治未病”的思路，在研究亚健康基础数据库的信息内容及其收集方法与标准的基础上，研究亚健康基础数据库结构、数据收集和数据管理的共性技术和方法，初步建立我国一体化亚健康基础数据库。包括：样本资料收集后的整理工作，样本信度的分析评估工作，亚健康监测资料的流行病学分析工作，亚健康监测网络运转及管理状况的评估分析工。

流行病学研究的基本方法篇6

1．1对象按照国家科技重大专项“十一五”课题《艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治》的要求，以深圳市居民作为目标人群，采用多阶段整群随机抽样法，选择1岁～59岁深圳户籍人口和在深圳居住6个月以上的暂住人口作为抽样对象。

1．2仪器与试剂MultiskanMK3酶标仪(芬兰);ELx50型洗板机(Bio－Tek公司);7500型荧光PCR仪(ABI公司)。HBV血清学标志物试剂盒(北京万泰生物药业有限公司，批号:B20101102);HBVDNA检测试剂盒(深圳匹基生物工程有限公司，批号:20100501);HBV基因分型PCR检测试剂盒(广州华银医药科技有限公司，批号:20100910)。

1．3方法

1．3．1标本采集在现场问卷调查的同时，对所有1周岁以上的调查对象均由当地社区医院采集静脉血2ml～4ml，冷藏并及时送往深圳市疾病预防控制中心，3000r/min离心5min进行血清分离，－20℃保存待检。对每名被采血人员都遵循知情自愿的原则，将采血目的和用途进行事先告知。

1．3．2HBVDNA载量及血清学标志物测定采用荧光定量PCR方法检测HBVDNA，严格按照试剂盒说明书进行操作，灵敏度为500IU/ml。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝两对半，均严格按照试剂盒说明书操作与判断结果。

1．3．3HBVDNA基因分型测定HBV基因分型采用荧光PCR法检测，严格按照试剂盒说明书进行操作。试剂盒检测下限为103IU/ml。

1．4统计学处理采用SPSS13．0软件进行数据处理和分析。均数间比较采用t检验，率的比较采用χ2检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1乙肝表面抗原流行情况此次共调查3771人，其中男性1834人，女性1937人，男、女比例为0．95∶1。调查人群中HBsAg阳性率为6．68%(252/3771)，整个年龄组中1岁～组最低，40岁～组最高，HBsAg阳性率随年龄上升有增加的趋势，差异有统计学意义(P＜0．05)(表1)。HBsAg阳性率男性为7．2%(132/1834)，女性为6．2%(120/1937)，各年龄组HBsAg在男、女之间差异无统计学意义(P＞0．05)。此外，调查对象中具有深圳户籍1898人，占调查人群的50．3%;非深圳户籍1873人，占调查人群的49．7%。2种户籍类型人群中，HBsAg阳性率较为接近，分别为6．32%(120/1898)、7．05%(132/1873)，差异无统计学意义(P＞0．05)。

2．2HBV基因型与性别的关系选择HBsAg阳性样本252份，在此基础上运用荧光定量PCR方法测定其病毒载量，共筛选出HBVDNA高于检测下限(≥1×103copy/ml)标本83例进行基因型分型研究。结果表明其中79例可检出基因型，4例未能分型，检出率为95．2%。其中B型为61例(73．5%)，C型为17例(20．5%)，B+C混合型仅有1例(1．2%)，差异有统计学意义(P＜0．05)，但B、C和B+C3种基因型在男、女之间差异无统计学意义(P＞0．05)(表2)。

2．3HBV基因型与年龄分布的关系B型感染者年龄为33．79岁±13．55岁，C型感染者年龄为37．41岁±14．10岁，两者之间差异无统计学意义(P＞0．05)。基因型的分布在年龄间比较差异有统计学意义(P＜0．05)，而且基因型检出率随着年龄增长呈现上升趋势，在15岁～59岁年龄组分布最高，B型检出率为86．9%，C型检出率为88．2%(表3)。

2．4HBV基因型与HBeAg、抗－HBeAg阳性率及HBVDNA水平的相关性分析由于B+C混合型仅1例，因例数太少未作统计学分析。C基因型感染者HBeAg、抗－HBeAg阳性率及HBVDNA水平均高于B基因型感染者，但差异无统计学意义(P＞0．05)(表4)。

3讨论

深圳是乙肝高发地区，也是当地严重的公共卫生问题之一。此次乙肝调查了解到1岁～59岁一般人群HBsAg阳性率为6．68%，5岁以下儿童HBsAg阳性率仅为0．16%，说明深圳乙肝感染情况好于广东省2006年病毒性肝炎调查的情况，也好于全国其他城市。结果显示，HBsAg阳性率在不同年龄组差异具有统计学意义，且阳性率随着年龄增长有上升趋势。这可能由于20岁～59岁年龄组是社会人群的主流，工作和社交较为广泛，增加了乙肝病毒感染的机会，是导致该年龄组人群乙肝高发的主要原因。对此情况应该针对人群加大乙肝防治知识的宣传力度，加强乙肝疫苗的接种。

HBV基因型具有明显的地理分布特点，目前在我国流行的主要为B型和C型，其中北方以C型为主，南方以B型为主，在新疆等边远地区可有D基因型分布。各地报道的基因型分布特点有较大的差异性，确切分布状况还不十分清楚。本研究结果显示深圳市HBV基因型分布以B型为绝对优势基因型，C型次之，B+C混合型偶有发生，符合深圳地区处于南方的地理特点。B、C2种基因型中男性感染者的构成比均高于女性感染者，但基因型在男、女间分布差异不具有统计学意义，提示基因型别与不同性别之间无明显相关性，与其他研究结果一致。此外，还发现在不同的年龄阶段基因型分布不均衡，在15岁～59岁年龄组分布最高，差异具有统计学意义。研究中采用的荧光PCR方法快速、方便、阳性率高，适合大规模的临床和流行病学调查，但是由于试剂盒引物的限制，本研究只能检测B型、C型及B+C混合型。全基因序列测定法是金标准，可实际操作困难、费用较高。对于4例感染者未能分型，可能是其他基因型，可考虑下一步用全基因序列测定法进行分型。

流行病学研究的基本方法篇7

二、实验法

三、理论和方法的研究

流行病学研究方法大致可分为如下类别。

（一）观察法

由于流行病学是人群中进行研究，所以研究者实际上不能或不能全部掌握或控制所研究对象发生的条件，因此，观察法（observational method）就是很重要的方法。

1．描述性研究（descriptive study）描述性研究又叫描述流行病学（descriptive epi-demiology），通过观察而正确、详细地记载疾病或健康状态按时间、地点、人群各种特征（如年龄、性别、职业、民族等等）的分布特点，也可以包括可疑病因因子的分布特点。为了正确的描述分布，必须有明确统一的诊断标准、准确的病例（或因子）数字以及人口数字。

通过描述流行病学获得的资料也可对病因提出线索或假说，或对防制提出有效的措施。

2．分析性研究（analytical study）分析性研究又叫分析流行病学（analytical epi-demiology），对所假设的病因或流行因素进一步在选择的人群中探找疾病发生的条件和规律，验证所提出的假说。主要有两种：①从疾病（结果）开始去探找原因（病因）的方法叫病例对照研究（case-control study），从时间上是回顾性的，所以又叫回顾性（retrospective）研究。②从有无可疑原因（病因）开始去观察是否发生结果（疾病）的研究方法叫队列（或群组、定群）研究（cohort study）。从时间上是前瞻的，所以又叫前瞻性（prospective）研究。

流行病学研究时还需要广泛使用多种其他有关的技术与方法。所需要的方法在数量上有超过临床所需。比如伤寒病，临床培养出伤寒杆菌即可以诊断，流行病学有时还需要知道其噬菌体型或其他特征；临床只需要从病人中分离细菌，流行病学还要检查外界物品、土壤、水中的细菌。流行病学需要做大量人群的检验，需要快速方法，以便在短时间内做大量标本检验。所以，流行病学研究需要设备良好的许多种实验为其服务。

（二）实验法

流行病学中所用的实验法（experimental method）也叫作实验流行病学（experimental　epidemiology），它和一般医学基础学科的实验不同，主要在人群现场进行。人群现场是流行病学的主要的、最大的实验室。根据研究对象不同，又可分为：临床试验（clinical trial）和人群现场试验（community field trial）。后一类实验中对病因进行干预的又叫干预研究（intervention study’或译作防治实验研究）。当被观察对象不能随机化分组时，叫作半实验或准实验研究（quasi-experimental study），如卫生政策的可行性研究及管理与服务的评价研究等。

流行病学研究的基本方法篇8

群体遗传学在1920年被确认为一门学科。1960年它又分为两个分枝，一个与历史过程有关，将遗传学与人类学以及在其他物种的古生物学和分类学结合。另一分枝与同时期人群的遗传有关，将遗传 学与流行病学、医学、心理学以及在其他物种的农学相结合［1］。后一分枝在本世纪80年代中期产生了遗传流行病学，并被人们普遍接受。它是遗传学与流行病学相互渗透产生的一门完整的独立的边缘学科，合并了流行病、统计学方法与分子遗传学技术，把许多背景不同的研究者联系到了一起。它是群体遗传学中最年轻和发展最快的分枝。Morton［1］认为群体遗传学的每个方面，只要不是主要涉及进化的，就属于遗传流行病学的内容。

遗传学与流行病学的结合是近代对复杂疾病病因认识的需要。1954年Neel和Schull就提出新的学科术语“流行病遗传学”(epidemiological genetics)，即研究遗传和疾病的关系。后来Morton和Chung等一致认为流行病和遗传学方法的结合是必需的、不可避免的，而决定家族聚集性的因素有可能是纯环境的，“流行病遗传学”未考虑环境假设，容易产生偏颇，故于1978年正式使用“遗传流行病学”术语［2，3］，即遗传流行病学是“研究亲属中疾病和病因、分布和控制以及研究在人群中疾病遗传的原因的一门学科”。这一定义为人们所普遍接受。

研究方法

包括群体和家系研究。家系研究一般包括三个连续的步骤：有无家族聚集性、遗传和环境因素的作用如何、遗传机制。

一、群体研究：流行病学的主要内容包括研究环境病因的作用，所以遗传流行病学也包括群体的病因研究，即研究环境与遗传因素及其交互作用在疾病发生中的作用［4，5］。众所周知，几乎所有的疾病都涉及遗传和非遗传因素及其相互作用。肿瘤发生的“二次打击”学说就是早期著名的将流行病学分析用于医学遗传学的成功例子［4］。研究发病率在时间、地点、胎次等的变化，以及比较疾病易感基因在病例与对照分布的关联研究都属于群体研究的内容。

二、家族聚集性研究：家族聚集现象间接反映了遗传因素的存在。研究方法包括病例对照和定群研究。判断标准如下：①患者亲属的患病率或发病率高于对照亲属或普通人群；②有家族史患者亲属的发病率高于随机人群患者亲属；③与患者血缘关系越近发病率越高；④数量性状亲属对之间的相关大于非亲属对［6］。

三、双生子和养子研究：用于区分遗传和非遗传病因。双生子研究假设单卵双生子(MZ)和异卵双生子(DZ)所处的环境相似，如果MZ的疾病一致率高于DZ，表明家族因素中有遗传因子的存在。养子研究是通过比较患病养子的血缘亲属和非血缘亲属的发病危险性，或比较患病和非患病养子的血缘亲属的发病危险性来证实遗传因素的存在。存在的问题是样本较难获得，对合子确认方法不明确会造成偏倚，对于大多数复杂疾病，双生子中仅很少一部分是家族遗传的，使平均一致率降低，难以取得强的遗传因素的证据。因此，考虑其他变量以识别可能的疾病异质性显得很重要［7］。

四、遗传方式的研究(分离分析)：确定了遗传因素的存在，就要了解与该病相关的位点数和这些位点的基因的遗传方式。由于实际的遗传方式可能很复杂，一般考虑简单化模型，即证实单位点(或最多2～3个位点)的存在。该位点的等位基因对患病易感性有主效应，将剩余的易感性变异分为家族和非家族的因素。通常估计家系资料在不同的遗传模型下的概率，研究哪种模型最适合此批数据。最大似然方法用于比较模型和获得参数的估计值，如基因频率和年龄特异的外显率。还可以检验基因型和发病年龄的关系以及环境因素的效应。

五、易感基因的定位(连锁研究)：当研究提示一或多个主基因与疾病发生有关，就必须识别这(些)基因的分子特征。连锁分析通过检查几个位点上的等位基因以何种组合从一代传递到下一代，来推断两个或以上位点(以及疾病位点)的相对位置。该方法依赖于可获得的多态性标记。减数分裂时来自父母的不同染色体间进行遗传物质的交叉和交换。染色体上两位点之间交叉的概率为重组分数(θ)。当θ为0时，表示两位点未出现交叉，二者相距极近，θ为0.5时，表示两位点的等位基因在减数分裂时随机组合，故两位点不在同一染色体上，或在同一染色体上相距很远。重组分数越小，两位点相距越近。

lod score方法假设在已知的遗传模型和某一θ值(0～0.5)下，计算观察家系的似然度(likelihood)与θ=0.5时似然度的比值的对数(lod值)，最大lod值下的θ值是最可能的重组分数值。若lod值≥3，一般认为有连锁，≤2则认为无连锁。虽然最终的分子分析将物理定位这一基因，但连锁分析极其重要［8］。lod score方法需要知道疾病位点的参数，如遗传方式、基因频率和外显率，参数估计错误会降低检验效能。故近年越来越多地应用非参数方法，如患病同胞对、患病亲属对、传递不平衡检验(transmission/disequilibrium test， TDT)等。TDT法是分析异质性的父母某些标记等位基因是否比其它更可能被传递到患病子女［9］。

随着DNA技术的发展以及多态分子标记的发现，近年来开始用全基因组扫描的方法来进行疾病基因定位，这种方法需大量的分子标记，通常多于300个位点，但该方法大大提高了发现疾病基因的机会。

六、遗传与环境的相互作用：基因控制机体对环境的敏感性，这一现象在生物界很常见。遗传与环境相互联系，基因可能影响个体对高危环境的选择、修饰机体对环境因子的易感性。例如，基因可控制人体对饮食钠的高血压反应、对环境毒物的降解效应、长期吸烟对肺功能的影响、对油脂和胆固醇消费改变的血浆脂质反应［10］等。一些功能性多态基因的不同表达可能需要环境的影响，或因多态性影响代谢途径，而后者又依赖于环境所提供的底物的可获得性，或因转录环境信号给基因的转录因子与多态调节顺序的相互作用不同［11］。如高密度脂蛋白(HDL)与冠心病有显著负相关。胆固醇酯转移蛋白(CETP)可促进HDL的转化。因此CETP活性增加使冠心病的危险性增加。而酒精消费对CETP活性可能是一重要调节因素。饮酒者CETP/TaqIB多态等位基因(B2)与血浆HDL胆固醇呈强正相关。在B2B2纯合子的个体，酒精对心肌梗塞有显著的保护作用［11］。

遗传流行病学在肿瘤［7］、精神疾病［8］、心血管病［11］、糖尿病等复杂疾病领域得到了广泛应用。以下列举了遗传流行病学方法在肿瘤和精神疾病研究中的应用。

在肿瘤和精神疾病中的应用

一、肿瘤遗传流行病学：肿瘤是由于自发的或环境暴露引起的生殖细胞(可遗传)或体细胞内基因突变，导致DNA水平的损伤引起的［12］。肿瘤遗传流行病学的主要目标是解决遗传突变在何种程度上与肿瘤的发生和发展有关。临床经常可见患者的家系成员患相同或不同部位的肿瘤，患者一级亲属的肿瘤发病机率一般增加2～3倍。大多数双生子研究发现MZ比DZ的疾病一致率高。

家系成员除了共享遗传物质，许多行为和环境特征也可能相似，因此一些研究用logistic回归方法分析遗传和环境变量的贡献。多数发现一些家系的肿瘤主要与遗传因素有关。如当控制了每个家系成员的年龄、性别、职业和酒精、吸烟消费后仍然发现肺癌患者的亲属肺癌发病率升高［13］。多数肿瘤在控制了年龄后，家族史是最重要的危险因素。危险性大小与患病亲属数和发病年龄呈函数关系。家族性患者的发病年龄更早。

对结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、卵巢癌以及软组织肉瘤的分离分析结果大多提示存在一或多个稀有的常染色体显性遗传基因的作用。基因频率多在0.002～0.006之间，即归于这些基因的病例占所有病例的5%～10%，剩余为散发，终身外显率高于60%。归于这(些)基因的病例部分随发病年龄的增加而降低。连锁分析成功的例子是乳腺癌和卵巢癌基因的发现。1990年报道乳腺癌与17q21连锁［14］，继而发现了位于17号染色体的BRCA1［15］，证实了分离分析的结果。遗传与环境相互作用研究发现，停经前有ERBB2过表达的乳腺癌患者多在年轻时服过口服避孕药；CYP2基因与吸烟相关的组织学类型的肺癌有关；卵巢癌家族史与口服避孕药相关。

二、精神疾病遗传流行病学：某些精神疾病有家族聚集现象。双生子研究发现焦虑和抑郁症存在共同的遗传成分，且可解释30%的表型方差。用多变量分析法对抑郁、焦虑、恐惧、恐慌、贪食、酒精中毒等六种精神疾病的研究发现，一组遗传成分主要与抑郁和焦虑症有关，另一组与恐惧、恐慌、贪食有关。酒精中毒的遗传成分虽然明显，但很大程度上是疾病特异的。精神分裂症MZ和DZ的疾病一致率分别为53%和15%。与养子的非血缘亲属或对照养子的血缘亲属和非血缘亲属相比，精神分裂症患者的血缘亲属发生该病的风险升高。血缘父亲嗜酒者比非嗜酒者的血缘养子发生酒精中毒的风险显著升高。

精神分裂症和躁狂抑郁症是否有单主基因效应还有争议，一些证据更支持多基因遗传而不是单主基因遗传，且至少3个位点与精神分裂症有关。很可能有多个微效基因，稀有主基因存在于某些高家族性病例中。连锁研究成功的将早发性家族性早老性痴呆(Alzheimer病)的主基因定位于21号和14号染色体，这依赖于该病的多代连续遗传、显性基因和高外显率。躁狂抑郁症的候选区域在Xq26～28和18号染色体的着丝粒周区，精神分裂症在6号染色体短臂。

群体相关分析发现早老性痴呆与阿朴脂蛋白E(ApoE)的ε4等位基因相关，酒精中毒与东方人群醛脱氢酶2(ALDH2)低活性形式有负相关。十年前，多数研究只是估计精神疾病的遗传方式，现在开始研究基因与环境的相互作用、家族性环境的性质、家族因素与社会和其他环境因素在发病中的相互关系［10］。考察遗传因素与社会事件对抑郁症的相互作用，发现一年内的不利生活事件是家族性的，遗传和环境因素各占20%。抑郁症患者的亲属生活事件发生率高，可能由于共享家族因素。遗传因素加强了不幸生活事件引起抑郁的作用。

结

语

遗传流行病学同时研究遗传和环境危险因素，尤其是致病过程中可能的基因-环境间的交互作用，今后将继续致力于揭示疾病的遗传特征、发现复杂疾病的遗传基因、研究遗传与环境的相互作用，以识别高发病风险的个体，通过控制危险因素制定基因型特异的预防和治疗策略。 参　考　文　献

1　Morton NE.Genetic epidemiology. Ann Hum Genet， 1997，61∶1.

2　Morton NE. Outline of Genetic Epidemioloigy. New York: Karger， 1982∶1-5.

3　Morton NE，Chung CS. Genetic Epidemiology. New York: Academic Press， 1978:ix-x.

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5　沈福民，孟炜.群体遗传学与遗传流行病学.见：沈福民主编，遗传医学.上海：上海医科大学出版社，1994∶127-143.

6　胡应，沈福民.遗传流行病学概述.见：耿贯一主编.流行病学.第三卷.第2版.北京：人民卫生出版社，1996∶669-683.

7　Claus EB.The genetic epidemiology of cancer.Cancer Surveys， 1996，25∶13.

8　Sham P. Genetic epidemiology.Br Med Bul， 1996， 52∶408.

9　Spielman RS， MCGinnis RE and Ewens WJ. Transmission test for linkage disequilibrium: The insulin gene region and insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM). Am J Hum Genet， 1993，52∶506.

10　Kendler KS. Genetic epidemiology in psychiatry. Arch Gen Psychiatry， 1995， 52∶895.

11　Cambien F. Insight into the genetic epidemiology of coronary heart disease. Ann Med， 1996，28∶465.

12　Stazi MA， Sampogna F. Genetic epidemiology: a powerful approach for the comprehension of cancer etiology. Ann Ist Super Sanita， 1996， 32∶167.

流行病学研究的基本方法篇9

近年来，我国十分重视中医证候诊断规范化的研究，探讨了一些疾病证候量化诊断的方法，对指导临床，促进科研工作和学术交流起到了积极的作用。1986年全国中医内科学会制订了《中风病中医证候诊断与疗效评定标准》［1］(简称《标准》)，使证候诊断有了一个基本的框架和大家共同遵守的基本原则。但是《标准》还存在着一些不足：①《标准》是非定量化的，可重复性、可交流性较差。受到医者水平、学术流派等因素的影响，同一病人在不同单位、个人处理时，辨证可能随个人主观倾向而偏倚，使多中心协作研究缺乏共同的基础。②《标准》把中风病中经络分为5个证类，中脏腑分为4个证类，基本上是2个证候和3个证候的组合，如气虚血瘀证、风火痰上扰清窍证等。受证类诊断术语的约束，临床工作中对有些病人难于进行证类的归属。1988年1月～1991年6月我们曾应用电子计算机中风病证候诊断软件对210例中风病人进行了追踪调查［2］，平均每个病人进入调查时发生3.16个基本证候，急性期平均每例变化4.9个证次，共出现58种组合形态。说明不可能用少数固定的证类概括多数中风病人，也不可能用一个证类概括一个病人的全过程。③《标准》缺乏等级可分辨性，不可能客观地记述证候的增减、进退，难以进行证候动态演变的研究分析。因此对中风病证候进行深入研究亟待解决的问题是建立规范化、定量化的证候诊断标准。

应用数学方法进行表述，是一门学科成熟的标志之一。目前，国际上十分流行应用量表的方法进行疾病诊断，并要求量表具有特异性、可靠性、敏感性、可行性、规范性、可计量性、可推广性等特点。本次研究，在中医理论指导下和大量临床实践的基础上，首先由中医、中西医结合专家提出了一个中风病证候诊断专家经验量表。然后应用多元回归、对应因子分析、聚类分析、线性映射等多种数学方法，对3026例中风病人、200例假中风病人进行了统计学处理，筛选出——风证、火热证、痰湿证、血瘀证、气虚证、阴虚阳亢证，建立了每个证候的量化诊断标准和数学模型。应用电子计算机可以迅速作出6个基本证候的量化诊断，并进行基本证候之间的随机组合。经过对1663例中风病人进行前瞻性检验，证候可辨率为95.79%，达不到证候诊断标准的70例也均有相应的分值。同时应用基本证候随机组合的方法能够准确地、动态地反映中风病人的真实病机，为中风病证候的深入研究提供了基础。

2　证候具有疾病本身所决定的特异性、阶段性、动态演变性3个基本特征。

2.1　以病统证、提高证候诊断的特异性

每个疾病都有其特定的病因和病理，有一定的发展演变规律，包括了邪正斗争的全过程，是由不同的阶段，也就是不同的证候组成的。证候是呈现于外的综合性、特征性的总结，是邪正斗争在特定阶段总的形式，是认识疾病的途径和方法。对证候进行深入研究，目前一方面是研究证候的共性，如探讨气虚、阳虚、阴虚等证候的实质，这对认识和发展中医理论具有非常重要的意义；另一方面是探讨不同疾病证候的特异性，这对提高辨证论治水平无疑也是十分重要的。本次研究对1663例经CT或MRI确诊的脑出血、脑梗塞患者，进行了影像学诊断和证候诊断同步调查，研究分析了证候得分均值、发生概率、证候组合形式、组合形态与出血、梗塞等病变性质，左、右、双侧等病变侧位，脑出血区域、脑梗塞血管系统等病变部位，出血量、梗塞范围之间的相关关系。结果表明：病变性质、范围对证候有非常显著的影响，病变部位对证候有一定的影响。脑出血风证、火热证、痰湿证、血瘀证、气虚证的均值和发生概率显著高于脑梗塞，以3证及其以上组合形式为主，风、火、痰在各种组合形式中的地位高于脑梗塞。脑梗塞阴虚阳亢证的均值和发生概率显著高于脑出血，证候组合形式以两证组合及单证存在为主，在组合形态中痰瘀互阻的地位高于脑出血。混合中风介于两者之间。左侧病变气虚证的均值和发生概率显著高于右侧。跨区出血风证，原发脑室出血火热证、血瘀证、阴虚阳亢证，脑干出血气虚证，丘脑出血痰湿证的均值和发生概率显著高于 其他部位。梗塞血管系统对证候无显著影响。脑出血的出血量与风证、气虚证的均值和发生概率呈显著的正相关关系；脑梗塞的梗塞范围与痰湿证、气虚证的均值和发生概率呈显著的正相关关系。经过探讨证候与脑病理改变的相关关系，提高了中风病证候的病理诊断水平和特异性，为指导临床治疗提供了客观依据。

2.2　对证候阶段性的横断时限界定是保证证候研究科学性、准确性的基本条件之一

证候是动态变化的，与疾病的不同阶段有显著的关系，选择研究对象时所处的病程阶段不同可能得出截然不同的结论。特别是中风病的证候变化多端，比如，风证在中风病发病时得分均值和发生概率分别为11.24%、80.76%，1周后则变为4.27%、21.30%。在以往的研究中还没有人对研究对象作病程阶段的限定，这无疑是造成对中风病因病机认识不一致和一些很好的经验在其他单位不能得到重复验证的原因之一。本研究首次限定发病至进入调查时间≤72h的患者作为研究对象。在1663例患者中≤24h的951例，占57.19%，平均(25.91±20.1)h，基本上可以反映中风病始发态的证候特征。通过证候得分均值、发生概率、组合形式、组合形态、证候组合阵形图、证候相关关系矩阵，分析了中风病证候的发生组合规律，为深入认识中风病的病因学、发病学，客观评价病因病机提供了理论依据。

2.3　研究证候的动态演变规律才能全面地、完整地认识一个疾病的证候特点

疾病的病理基础决定了它有一定的传变规律和发展趋势。研究疾病的病能和病势，把握其发生和发展规律，截断其恶化趋势，是中医学治未病的预防治疗思想的体现。病能和病势是由疾病各个阶段的证候体现的，所以研究疾病的发展规律实际上就是研究证候的演变规律。过去由于缺乏客观的、定量化的证候诊断标准，使追踪研究证候的动态变化受到限制。本次研究在建立了证候量化诊断标准的基础上，对733例中风病始发态患者进行了为期4周的7次追踪调查。结果显示：证候的得分均值、发生概率、组合形式、组合形态是动态变化的，随时间序列呈现一定的规律性，并受到病变性质的影响；求得了不同时间序列6个基本证候逐阶转移概率和高阶转移概率。研究分析了6个基本证候在急性期各个阶段的地位和意义，为预测证候由一个阶段进入下一个阶段或由始发态一步进入各个时间序列的发展趋势提供了客观依据，也为深入认识中风病急性期的病因病机提供了依据。

3　证候深入研究要注意对影响因素的质量控制

中医学认为，体质与发病，体质与病证的变化都有十分密切的联系，同一邪气致病由于个体的差异性可以导致疾病的多变性和证候的多态性。所以在辨证论治时十分注意整体观念和素体、新感、宿疾等因素对辨证的影响。在中风病证候研究时，为了保证研究的准确性，一方面对证候影响因素进行了严格的质量控制，研究对象均为未用药或未正规用药的患者，伴发疾病评分和既往史评分均控制在5分以内，排除了药物、并发症对中风证候的干扰。另一方面，研究分析了年龄、性别、职业、伴发疾病、既往史对证候得分均值、发生概率的影响。结果表明，男性患者痰湿证的均值和发生概率显著高于女性；气虚证、痰湿证、血瘀证得分均值和发生概率与年龄呈显著的正相关关系；风证、火热证的均值和发生概率，中青年组显著高于高龄组，提示中风病高龄患者在辨证治疗中要高度重视气虚证和痰瘀互阻的病因病机，而在中青年组要重视风火相煽；职业对中风病证候无规律性影响；伴发疾病和既往史对证候的均值和发生概率有显著的影响，二者呈显著的正相关关系。说明在进行证候的深入研究和新药开发评价时，要注意这些影响因素的质量控制。

4　证候研究在方法学上与国际临床研究的要求接轨问题

近年来，国际上对临床研究的要求更严格。可信的结论必须是覆盖面大、大样本、多中心协作的，设计周密，观察指标明确，研究对象选择严格合理的前瞻性研究，且资料需经电子计算机进行科学的统计学处理。进入90年代，世界卫生组织和美国国立

神经精神疾病研究所作了两个特别报告［3，4］，对国际脑血管病研究现状做了总结，除在流行病学部分摘录了中国的资料外，没有中医药的内容。这固然和我国的一些研究资料未能进入国际资料库有关，但更重要的还是研究方法学的缺陷，作为中医诊断治疗疾病基础的辨证诊断未能得到承认，中医疾病诊断也还没有列入CCD、ICD。因此，从中医药学术走向世界的需要出发， 中医证候学的研究在方法学上，亟待与国际临床研究的要求接轨。本研究在前瞻性科研设计下组织了12个省市的23家医疗单位、大专院校协作攻关，样本数量达到6763个。应用DME的方法统一标准、统一研前培训、填写统一的调研表，并应用电子计算机进行统一的资料处理，基本符合了国际临床研究的要求，这在中风病证候学研究上尚属首次，对中医证候学研究也是一种探索和尝试。中医证候学是中医理论体系中的精髓，对其进行深入研究的难度很大。现在一方面做了大量的临床工作，积累了丰富的经验；另一方面现代科学技术和检测手段有了相当程度的普及，具备了组织联合攻关的基础和条件。相信经过大家的共同努力，中医证候学研究必然会出现突破性进展。

参考文献

1　中华全国中医学会.中风病中医诊断与疗效评定标准.中国医药学报，1986，1(2)：56～57

流行病学研究的基本方法篇10

近年来，我国十分重视中医证候诊断规范化的研究，探讨了一些疾病证候量化诊断的方法，对指导临床，促进科研工作和学术交流起到了积极的作用。1986年全国中医内科学会制订了《中风病中医证候诊断与疗效评定标准》［1］(简称《标准》)，使证候诊断有了一个基本的框架和大家共同遵守的基本原则。但是《标准》还存在着一些不足：①《标准》是非定量化的，可重复性、可交流性较差。受到医者水平、学术流派等因素的影响，同一病人在不同单位、个人处理时，辨证可能随个人主观倾向而偏倚，使多中心协作研究缺乏共同的基础。②《标准》把中风病中经络分为5个证类，中脏腑分为4个证类，基本上是2个证候和3个证候的组合，如气虚血瘀证、风火痰上扰清窍证等。受证类诊断术语的约束，临床工作中对有些病人难于进行证类的归属。1988年1月～1991年6月我们曾应用电子计算机中风病证候诊断软件对210例中风病人进行了追踪调查［2］，平均每个病人进入调查时发生3.16个基本证候，急性期平均每例变化4.9个证次，共出现58种组合形态。说明不可能用少数固定的证类概括多数中风病人，也不可能用一个证类概括一个病人的全过程。③《标准》缺乏等级可分辨性，不可能客观地记述证候的增减、进退，难以进行证候动态演变的研究分析。因此对中风病证候进行深入研究亟待解决的问题是建立规范化、定量化的证候诊断标准。

应用数学方法进行表述，是一门学科成熟的标志之一。目前，国际上十分流行应用量表的方法进行疾病诊断，并要求量表具有特异性、可靠性、敏感性、可行性、规范性、可计量性、可推广性等特点。本次研究，在中医理论指导下和大量临床实践的基础上，首先由中医、中西医结合专家提出了一个中风病证候诊断专家经验量表。然后应用多元回归、对应因子分析、聚类分析、线性映射等多种数学方法，对3026例中风病人、200例假中风病人进行了统计学处理，筛选出——风证、火热证、痰湿证、血瘀证、气虚证、阴虚阳亢证，建立了每个证候的量化诊断标准和数学模型。应用电子计算机可以迅速作出6个基本证候的量化诊断，并进行基本证候之间的随机组合。经过对1663例中风病人进行前瞻性检验，证候可辨率为95.79%，达不到证候诊断标准的70例也均有相应的分值。同时应用基本证候随机组合的方法能够准确地、动态地反映中风病人的真实病机，为中风病证候的深入研究提供了基础。

2　证候具有疾病本身所决定的特异性、阶段性、动态演变性3个基本特征。

2.1　以病统证、提高证候诊断的特异性

每个疾病都有其特定的病因和病理，有一定的发展演变规律，包括了邪正斗争的全过程，是由不同的阶段，也就是不同的证候组成的。证候是呈现于外的综合性、特征性的总结，是邪正斗争在特定阶段总的形式，是认识疾病的途径和方法。对证候进行深入研究，目前一方面是研究证候的共性，如探讨气虚、阳虚、阴虚等证候的实质，这对认识和发展中医理论具有非常重要的意义；另一方面是探讨不同疾病证候的特异性，这对提高辨证论治水平无疑也是十分重要的。本次研究对1663例经CT或MRI确诊的脑出血、脑梗塞患者，进行了影像学诊断和证候诊断同步调查，研究分析了证候得分均值、发生概率、证候组合形式、组合形态与出血、梗塞等病变性质，左、右、双侧等病变侧位，脑出血区域、脑梗塞血管系统等病变部位，出血量、梗塞范围之间的相关关系。结果表明：病变性质、范围对证候有非常显著的影响，病变部位对证候有一定的影响。脑出血风证、火热证、痰湿证、血瘀证、气虚证的均值和发生概率显著高于脑梗塞，以3证及其以上组合形式为主，风、火、痰在各种组合形式中的地位高于脑梗塞。脑梗塞阴虚阳亢证的均值和发生概率显著高于脑出血，证候组合形式以两证组合及单证存在为主，在组合形态中痰瘀互阻的地位高于脑出血。混合中风介于两者之间。左侧病变气虚证的均值和发生概率显著高于右侧。跨区出血风证，原发脑室出血火热证、血瘀证、阴虚阳亢证，脑干出血气虚证，丘脑出血痰湿证的均值和发生概率显著高于 其他部位。梗塞血管系统对证候无显著影响。脑出血的出血量与风证、气虚证的均值和发生概率呈显著的正相关关系；脑梗塞的梗塞范围与痰湿证、气虚证的均值和发生概率呈显著的正相关关系。经过探讨证候与脑病理改变的相关关系，提高了中风病证候的病理诊断水平和特异性，为指导临床治疗提供了客观依据。

2.2　对证候阶段性的横断时限界定是保证证候研究科学性、准确性的基本条件之一

证候是动态变化的，与疾病的不同阶段有显著的关系，选择研究对象时所处的病程阶段不同可能得出截然不同的结论。特别是中风病的证候变化多端，比如，风证在中风病发病时得分均值和发生概率分别为11.24%、80.76%，1周后则变为4.27%、21.30%。在以往的研究中还没有人对研究对象作病程阶段的限定，这无疑是造成对中风病因病机认识不一致和一些很好的经验在其他单位不能得到重复验证的原因之一。本研究首次限定发病至进入调查时间≤72h的患者作为研究对象。在1663例患者中≤24h的951例，占57.19%，平均(25.91±20.1)h，基本上可以反映中风病始发态的证候特征。通过证候得分均值、发生概率、组合形式、组合形态、证候组合阵形图、证候相关关系矩阵，分析了中风病证候的发生组合规律，为深入认识中风病的病因学、发病学，客观评价病因病机提供了理论依据。

2.3　研究证候的动态演变规律才能全面地、完整地认识一个疾病的证候特点

疾病的病理基础决定了它有一定的传变规律和发展趋势。研究疾病的病能和病势，把握其发生和发展规律，截断其恶化趋势，是中医学治未病的预防治疗思想的体现。病能和病势是由疾病各个阶段的证候体现的，所以研究疾病的发展规律实际上就是研究证候的演变规律。过去由于缺乏客观的、定量化的证候诊断标准，使追踪研究证候的动态变化受到限制。本次研究在建立了证候量化诊断标准的基础上，对733例中风病始发态患者进行了为期4周的7次追踪调查。结果显示：证候的得分均值、发生概率、组合形式、组合形态是动态变化的，随时间序列呈现一定的规律性，并受到病变性质的影响；求得了不同时间序列6个基本证候逐阶转移概率和高阶转移概率。研究分析了6个基本证候在急性期各个阶段的地位和意义，为预测证候由一个阶段进入下一个阶段或由始发态一步进入各个时间序列的发展趋势提供了客观依据，也为深入认识中风病急性期的病因病机提供了依据。

3　证候深入研究要注意对影响因素的质量控制

中医学认为，体质与发病，体质与病证的变化都有十分密切的联系，同一邪气致病由于个体的差异性可以导致疾病的多变性和证候的多态性。所以在辨证论治时十分注意整体观念和素体、新感、宿疾等因素对辨证的影响。在中风病证候研究时，为了保证研究的准确性，一方面对证候影响因素进行了严格的质量控制，研究对象均为未用药或未正规用药的患者，伴发疾病评分和既往史评分均控制在5分以内，排除了药物、并发症对中风证候的干扰。另一方面，研究分析了年龄、性别、职业、伴发疾病、既往史对证候得分均值、发生概率的影响。结果表明，男性患者痰湿证的均值和发生概率显著高于女性；气虚证、痰湿证、血瘀证得分均值和发生概率与年龄呈显著的正相关关系；风证、火热证的均值和发生概率，中青年组显著高于高龄组，提示中风病高龄患者在辨证治疗中要高度重视气虚证和痰瘀互阻的病因病机，而在中青年组要重视风火相煽；职业对中风病证候无规律性影响；伴发疾病和既往史对证候的均值和发生概率有显著的影响，二者呈显著的正相关关系。说明在进行证候的深入研究和新药开发评价时，要注意这些影响因素的质量控制。

4　证候研究在方法学上与国际临床研究的要求接轨问题

近年来，国际上对临床研究的要求更严格。可信的结论必须是覆盖面大、大样本、多中心协作的，设计周密，观察指标明确，研究对象选择严格合理的前瞻性研究，且资料需经电子计算机进行科学的统计学处理。进入90年代，世界卫生组织和美国国立

神经精神疾病研究所作了两个特别报告［3,4］，对国际脑血管病研究现状做了总结，除在流行病学部分摘录了中国的资料外，没有中医药的内容。这固然和我国的一些研究资料未能进入国际资料库有关，但更重要的还是研究方法学的缺陷，作为中医诊断治疗疾病基础的辨证诊断未能得到承认，中医疾病诊断也还没有列入CCD、ICD。因此，从中医药学术走向世界的需要出发， 中医证候学的研究在方法学上，亟待与国际临床研究的要求接轨。本研究在前瞻性科研设计下组织了12个省市的23家医疗单位、大专院校协作攻关，样本数量达到6763个。应用DME的方法统一标准、统一研前培训、填写统一的调研表，并应用电子计算机进行统一的资料处理，基本符合了国际临床研究的要求，这在中风病证候学研究上尚属首次，对中医证候学研究也是一种探索和尝试。中医证候学是中医理论体系中的精髓，对其进行深入研究的难度很大。现在一方面做了大量的临床工作，积累了丰富的经验；另一方面现代科学技术和检测手段有了相当程度的普及，具备了组织联合攻关的基础和条件。相信经过大家的共同努力，中医证候学研究必然会出现突破性进展。

参考文献

1　中华全国中医学会.中风病中医诊断与疗效评定标准.中国医药学报，1986，1(2)：56～57

流行病学研究的基本方法篇11

中医学自身的学科特点决定了在今后相当长的时期内，学术继承和发扬是学科建设的主要任务。中医学包括中医儿科学的大量学术积累，其中蕴藏着大量的真知灼见，任何学科的发展都离不开对已有学术成果的传承，因此，我们要发展中医儿科，就必须最大限度地弘扬本学科学术精华，特别是在中医儿科临床上，充分发挥本学科有特色、优势的治法、病种，扩大学科服务范围，继而谋求加快学科学术发展的速度，这是本学科学术进步和事业发展的中心任务。

1 发挥学科特色优势是面向临床的主要任务

在目前中医、中西医结合、西医儿科并存的格局下，医疗市场行业竞争激烈。中国和世界各国中医儿科的临床工作发展很不平衡，一些单位的中医儿科迅速发展，也有一些单位的工作在萎缩。凡是工作开展好的单位，共同的经验都是发挥了中医药的特色和优势。因此，能否发挥好中医儿科的学科特色和优势，就成了我们事业成败的关键。

关于中医儿科的特色优势病种，我们在2007年曾组织了中国城乡不同地区、不同等级医院、不同职称级别、中医中西医不同专业儿科工作者的抽样问卷调查。调查结果显示，与西医相比，大多认为中医儿科（某些情况下的中西医结合）在下列病种（证）或其某个阶段具有治疗优势。(1)新生儿疾病：胎怯（早产儿和足月小样儿）、新生儿黄疸、新生儿硬肿症、新生儿腹泻、新生儿脐部疾患等。(2)呼吸系统疾病：急性上呼吸道感染、急慢性支气管炎、毛细支气管炎、病毒性肺炎与其他类型肺炎、反复呼吸道感染等。(3)消化系统疾病：鹅口疮、口炎、胃食管返流及反流性食管炎、胃炎、消化性溃疡、厌食、小儿腹泻等。(4)营养性疾病：消化不良、营养障碍、营养性贫血等。(5)循环系统疾病：病毒性心肌炎等。(6)泌尿系统疾病：急性肾小球肾炎、肾病综合征、血尿、泌尿道感染、遗尿症等。(7)神经肌肉系统疾病：小儿癫痫、脑性瘫痪、惊厥等。(8)心理行为障碍性疾病：多发性抽搐症、注意力缺陷多动障碍等。(9)内分泌疾病：性早熟。(10)免疫、变态反应、结缔组织病：支气管哮喘、过敏性鼻炎、过敏性紫癜、湿疹、皮肤黏膜淋巴结综合征，幼年类风湿病等。(11)感染性疾病：麻疹、风疹、幼儿急疹、水痘、手足口病、流行性腮腺炎、流行性感冒、传染性单核细胞增多症、流行性乙型脑炎等病毒性脑炎、百日咳、急性感染性多神经根炎等。同时，中医特色疗法，如推拿疗法、针灸疗法、中药外治疗法等，在儿科疾病治疗中有着广泛的应用和良好的效果。

从以上中医儿科特色优势病种来看，涵盖了儿科临床常见的多数疾病。中医儿科不仅在许多儿科慢性病中具有整体调节、扶正祛邪的特色，而且在急性疾病，特别是感染性疾病治疗中有很大优势。中医儿科临床优势突出表现在以下几方面。

一是急性病毒感染性疾病。据世界卫生组织（whc）的统计资料显示，近年来，在儿科急性感染性疾病中，细菌感染性疾病呈下降趋势，病毒感染性疾病呈上升趋势。我国近年小儿呼吸系统感染性疾病临床研究资料表明，小儿急性上呼吸道感染90 %以上为病毒感染，急性支气管炎75 %为病毒感染，肺炎中约50 %为病毒感染。近几年造成广泛关注的公共卫生问题，如传染性非典型肺炎、禽流感、手足口病、甲型流感h1n1等，都属于病毒感染性疾病。已经有许多的临床研究资料证实，中医药治疗多种病毒感染性疾病较西药治疗更加有效、安全。例如：我们承担的“十五”国家科技攻关课题“小儿肺炎中医证治规律研究”经过四中心、360例、随机、盲法、对照临床研究，清肺口服液试验组痊愈显效率89.62 ％，利巴韦林对照组痊愈显效率73.92 ％，试验组疗效显著优于对照组(p＜0.0001)。我们承担的另一项“十五”国家科技攻关课题“中医药治疗病毒性肺炎疗效评价方法研究”结果，清开灵注射液联合儿童清肺口服液的中药治疗方案，与利巴韦林注射液联合复方愈创木酚磺酸钾口服液的西药治疗方案相比，不仅中药组的终点(10 d)疾病疗效评价优于西药组，而且多数评价指标（咳嗽、痰壅、发热、恶寒、紫绀、面色、口渴、食欲食量、舌象、脉率）中药组的起效时间早于西药组。

二是脾系疾病。脾系疾病是儿科临床发病率仅次于肺系疾病的常见疾病。脾系疾病包括消化道疾病和营养性疾病。中医药治疗消化道疾病如泄泻、积滞、厌食、功能性腹痛等，在调整消化道功能方面有着不可替代的优势。因矿物元素、维生素等营养物质缺乏所致疾病，如锌缺乏症、营养性缺铁性贫血、维生素d缺乏性佝偻病、疳证等，不仅不少中药中含有一定量的矿物元素和维生素等营养成分，增加了摄入量，更重要的是中药的调脾助运等作用，促进了机体对各种营养物质的吸收和利用，降低了不良反应。一批行之有效的中医临床诊疗操作技术在不断扩大应用，如推拿治疗小儿泄泻、便秘、腹痛，董氏指压手法治疗婴儿吐乳症技术等，这些简便有效诊疗技术的临床推广，扩大了中医特色疗法在中国城市社区、新型农村合作医疗及世界各国的普遍应用。

其他如中医药调补先后天治疗新生儿疾病，调整阴阳治疗小儿心理行为障碍性疾病，中西医结合治疗小儿肾脏病，发时治标、平时治本观点在慢性复发性疾病中的应用等，都是发扬儿科中医药治疗优势的例证。

中医儿科优势病种及特色疗法的临床应用，满足了现代社会对于儿童预防保健的需求，适应了现代临床疾病谱的变化，顺应了现代人对于医疗安全性的重视，减少了抗生素、激素等化学药物的滥用，在各国医疗保健事业中发挥了越来越大的作用。

2 加速学科学术发展是面向未来的主要任务

在历史跨入21世纪之时，我们总结过去，展望未来，还应当清醒地看到虽然中医儿科学的现展速度已经超过了历史上任何一个时期，但是，与西医儿科学和其他自然科学学科的发展速度相比，则显得相对滞后。我们必须加快学科学术发展速度，这才是面向未来、能够获得本学科可持续发展的正确选择。

任何一门学科的学术发展都需要依靠科学研究，中医儿科学的未来发展也必须依靠本学科科学研究的开展。中医儿科学科研的领域需要不断扩大、科研水平需要不断提高，才能推动学科的快速发展。

建立规范是学科学术发展的基础。所谓规范，库恩《科学革命结构》说：“她包括了一门学科的研究方法、总体框架以及最基本的概念、理论和定律。”由于历史的原因，中医儿科学在规范化、标准化方面所做的工作还很不够。中医儿科学科需要建立的规范，必须是能符合本学科学术特点和规范化要求的各种规范。例如：切合中医药学本义的中医儿科学名词术语规范，有中医药特色的诊断辨证标准，能反映中医药优势又能得到学术界公认的疗效评价标准，符合循证医学原则的临床研究规范，利于中成药开发又符合新药研究原则的制剂工艺和质量标准等。这些规范的产生，要通过科学研究来实现。在临床研究和数理统计分析基础上形成规范，是最佳的研究方法。但是，临床研究成本高、耗时费力。近年来，在儿科规范化工作中已普遍采用了文献研究、专家问卷调查等研究方法，特别是基于德尔菲法的专家问卷调查统计分析的方法，能集中本学科权威专家的意见，是一种在国际上被广泛采用的研究方法，在《儿科常见病中医诊疗指南》的研究中已经取得良好的效果，今后将会在中医儿科学规范化、标准化工作中有越来越广泛的应用。作为世界中医药学会联合会的重要任务之一，要求“制定并与中医药有关的国际行业标准”，我们儿科专业委员会今后在这方面将承担起与儿科有关的任务。

中医儿科学基础研究范围广泛。整体观点是中医学优势之一，要将儿童的孕育成长、保健预防、病因病机等，放到各个国家、各个民族不同的天时、地理、环境的大自然整体和脏腑经络、气血津液的内环境整体中加以认识。对中医儿科基本理论中的若干问题不要再过多地进行理论论争，要重视通过科研来认识其科学内涵，辨析正误，吸收其合理的部分用于指导临床。辨证学研究的重点是辨证客观化，即如何将通过现代检测方法获得的疾病微观信息纳入中医儿科学辨证体系以及如何将各种诊查方法所采集到的“证象”定性定量，从而形成客观的证候诊断标准。治疗学研究的重点，一是儿科常用治法的疗效机理研究，二是儿科药物剂型改革及多种疗法研究，三是有毒中药的毒理及减毒方法研究，四是各种治法的优化组合及其适应病证研究。要研究出更多疗效可靠、应用方便，适应当今和未来社会需要的儿科疗法和药剂。

临床研究的范围目前仍将侧重那些中医药有优势、儿科临床常见的病种。例如流行性感冒、病毒性肺炎、手足口病等病毒性疾病，哮喘、过敏性紫癜、肾病综合征等免疫性疾病，腹泻、营养素缺乏症、肥胖症等脾胃病，多发性抽动症、癫痫、脑性瘫痪等神经精神疾病，高热、惊风、血症等急症，低出生体质量儿、新生儿黄疸、新生儿硬肿症等新生儿疾病等。同时，在有条件的单位，要面向世界需求，开展中医药治疗儿科现代重点疾病的研究，如儿童艾滋病、各种新型流感等，争取在其中一些疾病取得突破。临床研究的重点在提高中医药临床疗效。要遵循现代流行病学、循证医学和临床科研方法，进行多中心协作攻关，力争探索出一些新的证治规律，研制出一批疗效更好、副作用小而使用更为方便快捷的新药，研究提出中医药治疗的有效、安全、经济的优化治疗方案并加以推广。临床研究的内容将深化，如从笼统的一方治一病发展为辨证立方、异病同治；对难治性疾病或其中某一证型、某一严重合并症等研制有针对性的方药；研究有效方药的剂型改革；研究有效方药的主要有效成分、有效单体并形成体现辨证论治特色的“创新中药”等。

实验研究将会更多地直接引入现代科学技术方法，为提升中医儿科诊疗水平服务。要装备先进的仪器设备，逐步研制出儿科常见病的病证结合动物模型，应用各种先进的研究方法，尤其是细胞、分子、基因、蛋白的研究方法，从宏观到微观的各个层次，揭示儿科有效中药及其他疗法的作用机理，为创新疗法、创新理论的建立奠定基础。

总之，中医儿科学科学研究的重点在临床，目的在于围绕临床疗效的提高，目标是学科创新性理论的产生，为中医儿科学事业发展，并最终实现学科现代化积累条件。

中医儿科学发展的关键在于人才。20世纪下半叶，中医儿科多层次、多形式人才培养的格局已经形成。今后，要根据学科发展需要，改进教学方法，更新教学内容，改善知识结构，提高动手能力，培养更多的中医儿科专业人才。首先是为数众多的临床人才拓展中医儿科服务范围，直接为各国儿童的健康事业服务。同时，必须通过研究生教育和继续教育，造就一批具有宽广深厚的中医理论基础、掌握相关现代科学知识和前沿技术、科研能力强的智能结构型人才，通过他们的创造性思维和捕捉学科学术发展热点问题的能力，经过规范、先进、严谨的科学研究，创造出高水平的科研成果，承担起推进中医儿科学科发展的重任。

在学科人才比较集中的单位和地区，要组织起一批实力强大的研究团队，团结合作，才能发挥集体的智慧和力量，在不同的研究领域取得突破。研究方向的确定，应以儿科临床常见疾病、中医药有优势的疾病、学科基础较好为原则，逐渐形成在中医儿科学科专业划分基础上的肺系疾病研究、脾系疾病研究、心肝疾病研究、肾系疾病研究、传染病研究、新生儿疾病研究等研究团队，扩大一批重点学科、重点专科、重点研究室、重点实验室等，不断提高研究水平，产生有创新意义的研究成果。

中医儿科学发展的战略目标是现代化。中医儿科学现代化，必须是对现有水平的超越，产生在传统中医儿科学基础上的质的飞跃，形成与现代自然科学、社会科学融会贯通，同步协调发展的新格局。中医儿科学现代化的实现绝不可能是一蹴而就的，需要通过各个领域、各种方法大量的研究积累，多少代人的长期努力，才能逐步达到。实现这一战略目标，必须以人才培养为基础、科学研究为动力，继承传统为先导、思维创新为途径，加速引进和应用现代科学技术，加快学科学术进步的步伐。可以相信，经过持之以恒的长期努力，中医儿科学的现代化，将会随着整个中医学的现代化而逐步实现。

中医儿科学发展至今，成绩斐然；中医儿科学发展前景远大光明。我们这一代中医儿科人，承前启后，肩负着历史的责任，任重道远。相信经过我们的不懈追求，中医儿科事业一定会以更快的速度向前发展。

predominance and characteristics of pediatrics of chinese medicine and its development strategy

wang shouchuan

流行病学研究的基本方法篇12

应对措施:采用问题导入式教学法。问题导入式教学法(PBL)是一种富有创意和实效的教学策略，PBL的核心是以学生为主体，以问题为中心。教师在熟悉教学大纲后，确定PBL的教学内容。设计教学问题，选择经典的案例，反应停与海豹畸形的病例对照研究、弗明汉心脏病的前瞻性研究、吸烟与肺癌关联的病例对照研究和队列研究及维生素C与坏血病关系的实验性研究等。课前1周将案例及问题发放给同学，并让其分组进行讨论，并做好作答准备。课堂教学时，教师首先简单地介绍案例，并循序渐进地提问，引发学生思考，并由某些小组作出回答，最后老师给予点评和总结。这些案例生动富有吸引力，能激发学生浓厚的学习兴趣，并调动学生课堂学习的积极性和主动性，使学生积极思考问题，从而提高他们综合运用所学的知识进行分析及解决问题的能力，启发了思维，是值得推广的教学方法。与其他西医院校一样，中医药院校还应该开展现场调查，让学生参与老师的调查研究。比如培训学生，组织他们参与调查门诊体检人群的中医体质/亚健康调查，使学生真正了解横断面研究方法。

另外，增加课堂模拟现场的实习方式，将实习课堂现场化。比如在暴发调查的实习中，用现成资料来模拟真实的现场，引导学生使用病例对照研究方法及时探索可疑病因，提高了学生解决和分析实际问题的能力。

课程设置存在问题

流行病学是一门方法学，是中医药院校学生需要掌握的一门课程。我校的专业中，除了卫生事业管理专业设置了流行病学课程外，中医临床(含七年制)、中西医临床(含七年制)、针灸(含七年制)、推拿、护理等专业也都开设了此课程。不同专业的课时数不一致，但总体而言，学时数一般为18学时，无法系统讲解流行病学的理论和方法。

应对措施:加强教材建设和调整教学内容。面对不同专业、不同培养层次的学生，设置不同的教学内容和学时。教师在教学工作中，应根据所授专业的特点，选择合适的教学内容，制定适当的教学方案。对我校卫生事业管理专业的学生，流行病学是主要的专业课程，安排学时多，系统全面地介绍流行病学的基本概念、原理、方法，使学生对流行病学有较全面系统的理解。对于中医相关专业的学生，重点讲授流行病学作为方法学学科的特点、基本的概念和常见的研究方法，让学生通过课程的学习了解科研的思路、内容和方法;另外简单介绍循证医学内容、传染病病种及防治原则。